Laboratórios de Enzimologia e Química de Proteínas
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2024-2025
01004605
Área Científica do Menor
Português
Presencial
Semestral
6.0
Opcional
1º Ciclo - Licenciatura
Conhecimentos de Base Recomendados
Química, Bioquímica de Proteínas, Ácidos Nucleicos e Lípidos.
Métodos de Ensino
A disciplina consiste em oito módulos introdutórios de aulas teórico-práticas e aulas práticas laboratoriais e num projecto a desenvolver intensivamente em quatro semanas. Para os módulos introdutórios o aluno dispõe de uma informação sumária do tema, da tecnologia a utilizar e 2 a 3 palavras chave para utilizar numa pesquisa na internet que terá de ser realizada antes da aula. O projecto consiste na elaboração e execução autónoma de um protocolo para a purificação de uma enzima sorteada de uma lista previamente apresentada.
Resultados de Aprendizagem
O objectivo central desta unidade curricular é a aquisição de conhecimentos técnicos e práticos sobre a extracção, purificação e caracterização de enzimas.
Pretende-se que o aluno adquira conhecimentos fundamentais da diversidade de actividades enzimáticas, e na caracterização físico-química de biomoléculas.
Pretende-se de igual modo que o aluno:
-aplique os conhecimentos adquiridos no desenho e avaliação de processos de purificação de proteínas e na caracterização da actividade enzimática.
-desenvolva competências de organização, planificação, autonomia e raciocínio crítico no laboratório
-desenvolva competências no processamento, análise apresentação e discussão de dados experimentais.
Estágio(s)
NãoPrograma
1. Pesquisa de actividade enzimática em extractos crus. Desenho de ensaios enzimáticos
2. Exploração das propriedades físico-químicas das biomoléculas no processo de separação:
2.1Cromatografia de Exclusão Molecular: Princípios e aplicações
2.2.Cromatografia de Troca iónica: Princípios e aplicações
2.3 Cromatografia de Afinidade. Princípios: afinidade, pseudo-afinidade.
2.4 Cromatografia de interacção hidrofóbica. Princípios e aplicações
2.4.FPLC e HPLC. Aplicações.
2.5 Electroforese nativa e electroforese na presença de substâncias dissociantes.Electroforese bidimensional. Aplicações
2.6 Electrotransferência, imunodetecção e imunoprecipitação. Príncipios e aplicações
3. Detecção e análise de modificações químicas em proteínas.
4. Caracterização da actividade enzimática .Determinação de parâmetros cinéticos . Activação e Inibição
5. Desenho e execução de protocolos de purificação de enzimas. Avaliação da eficiência e custos do protocolo de purificação.
Docente(s) responsável(eis)
Paula Cristina Veríssimo Pires
Métodos de Avaliação
Avaliação
Projecto: 25.0%
Exame: 25.0%
Apresentação e discussão do protocolo: 25.0%
Relatório do projecto realizado: 25.0%
Bibliografia
R.K. Scopes ( 1994) Protein Purification: Principles and practice, 3rd ed., Springer-Verlag, New York.
Base de dados de enzimas.* :BRENDA
http://www.brenda-enzymes.info/
*consulta directa para servidores associados a establecimentos do ensino superior
Base de Dados de proteases: MEROPS
http://merops.sanger.ac.uk/
Base de dados de estrutura molecular de proteinas: PDB Protein Data Bank
http://www.rcsb.org/pdb/home/home.do