Métodos e Técnicas em Biologia Molecular

Ano
1
Ano lectivo
2023-2024
Código
01001011
Área Científica
Biologia
Língua de Ensino
Português
Modo de Ensino
Presencial
Duração
Semestral
Créditos ECTS
6.0
Tipo
Obrigatória
Nível
1º Ciclo - Licenciatura

Conhecimentos de Base Recomendados

Conhecimentos básicos de Bioquímica e de Biologia Celular.

Métodos de Ensino

Para cada um dos 5 trabalhos práticos a realizar ao longo do semestre há disponível no “Inforestudante” um protocolo sumário, que os alunos devem ler antes da aula e completar com pesquisas autónomas. Nas aulas práticas é promovida a autonomia dos alunos na realização dos trabalhos práticos, feitos em grupos de 4 alunos. A maioria dos trabalhos práticos são realizados em várias aulas. Cada grupo de alunos apresenta oralmente um dos trabalhos realizados. Cada grupo de alunos faz também um relatório escrito sobre um dos trabalhos práticos realizados.   

Resultados de Aprendizagem

Esta unidade curricular tem como objectivo a aprendizagem por parte dos alunos dos fundamentos e funcionamento de metodologias essenciais para o estudo de macromoléculas com relevância biológica. Tem ainda por objectivo que os alunos compreendam as aplicações possíveis da utilização dessas tecnologias, e que perspectivem os avanços científicos emergentes nesta área e que são resultado dos avanços tecnológicos. O aluno deverá utilizar os conhecimentos e competências adquiridos para evoluir perante novas situações.

 

Competências a adquirir:

- Manipular o equipamento laboratorial básico de biologia molecular;

- Isolar, analisar e identificar biomoléculas;

- Realizar diagnósticos biológicos;

- Manipular o material genético;

- Realizar análises genéticos;

- Realizar bioensaios;

- Obter informação, desenhar experiências e interpretar os resultados;

- Redigir e executar projectos em biologia;

- Competência em aplicar na prática conhecimentos teóricos;

- Competência em raciocínio crítico.

Estágio(s)

Não

Programa

- Preparação de soluções

- Métodos colorimétricos para a determinação da quantidade e da actividade de proteínas

- Microscopia de fluorescência: marcação de DNA, imunocitoquimica e detecção de proteínas de fusão com a “Green fluorescente protein”.

- Amplificação de um fragmento de DNA por PCR a partir de DNA genómico humano

- Análise de restrição do fragmento de DNA amplificado para identificação de um polimorfismo (RFLP).

- Clonagem de um fragmento de DNA amplificado por PCR.

- Ligação do fragmento de DNA amplificado por PCR a um vector de clonagem

- Transformação de bactérias com o vector recombinante

- Expressão de uma proteína recombinante em E. coli; purificação e análise da proteína recombinante

- Purificação da proteína recombinante por cromatografia de afinidade

- Análise da proteína recombinante em gel de poliacrilamida em condições desnaturantes

- Western blot com anticorpo especifico contra a proteína recombinante produzida.

Docente(s) responsável(eis)

Carlos Jorge Alves Miranda Bandeira Duarte

Métodos de Avaliação

Avaliação
Relatório de seminário ou visita de estudo: 10.0%
Trabalho laboratorial ou de campo: 25.0%
Exame: 65.0%

Bibliografia

WILSON, K. & WALKER, J. (2010) Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology. 7ª ed. Cambridge University Press.

BROWN, T. A. (2010) Gene Cloning and DNA analysis. 6 ª ed. Blackwell Science.

VIDEIRA, A. (2001) Engenharia genética: princípios e aplicações. LIDEL.

GLICK, B.R. & PASTERNAK, J.J. (2009) Molecular Biotechnology. 4ª Ed. ASM Press.

WATSON, J.D.; GILMAN, M.; WITKOWSLI, J. [et.al.] (1992) Recombinant DNA. W.H. Freeman and Company. ISBN: 0-7167-1994-0.

BERG, J.M.; TYMOCZKO, J.L.; STRYER, L. (2011) Biochemistry7ª Ed. W.H. Freeman and Company